经纤维支气管镜活检的肺癌组织P-糖蛋白的表达及其临床意义
作者：崔杰 周俊 刘慧民
单位：崔杰 周俊(甘肃省肿瘤医院内一科 病理科,甘肃兰州730050)；刘慧民(中国民航兰州医院外科,甘肃兰州730020)
关键词：肺癌；P-糖蛋白；免疫组化；预后
癌症000631
中图分类号：R734.2 文献标识码：A
文章编号:1000-467X(2000)06-0608-01
我们用免疫组化法检测经支气管镜活检的肺癌组织中P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)表达特点，分析其与组织类型、分化程度、化疗疗效及预后的关系，以评估其临床应用价值。
1 材料与方法
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1.1材料来源
我院1993年～1995年间经病理确诊的54例肺癌组织，均为化疗前患者的纤维支气管镜活检组织，同时取非肿瘤支气管粘膜及粘膜下组织10例。54例肺癌患者，男40例，女14例，中位年龄56岁(23～73岁)。非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer，NSCLC)37例，其中鳞癌28例，腺癌9例；小细胞肺癌(smallcelllungcancer，SCLC)17例。根据1989年国际抗癌联盟(UICC)的分期进行临床分期：Ⅱ期7例，Ⅲ期28例，Ⅳ期19例。
1.2方法
采用免疫组化S-P法，P-gp单克隆抗体为美国Maxim公司产品，S-P试剂盒为美国Zymed公司产品，先用pH6-0的枸橼酸钠溶液进行微波抗原修复10min，蒸馏水冲洗3次后进行免疫组化染色，用10%的PBS液代替第一抗体阴性对照，以已知阳性的肺癌组织作阳性对照。免疫组化染色方法严格按说明常规操作。P-gp阳性标准：凡胞浆中有棕色颗粒着染者为阳性。程度：片中着染者细胞<20%为(+)，20%～49%(++)，≥50%为(+++)[1]。
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1.3统计方法
χ2检验比较显著性。Kaplan-meier法分析生存率并经Log-rank检验。
2 结果
54例肺癌组织中P-gp(+)检出率50%(27/54)。P-gp(+)在NSCLC和SCLC均有表达，前者表达阳性率高于后者(χ2=5.49，P<0.05)，见表1。中分化及高分化鳞癌、腺癌的P-gp表达阳性率74.1%(20/27)，均高于低分化鳞、腺癌30%(3/10)(χ2=6.03，P<0.05)，见表2。治疗肺鳞癌CAP方案(CTX、ADM、DDP)，肺腺癌MFP方案(MMC、5-Fu、DDP)，小细胞肺癌EP方案(VP-16、DDP)。治疗有效率：25例肺癌接受化疗，P-gp(+)9例中，PR1例，NC4例，PD4例；P-gp(-)16例中，CR2例，PR7例，NC3例，PD4例；P-gp(+)有效率为11%(1/9)，P-gp(-)有效率为56.3%(9/16)。其中P-gp(+)12例，生存期1～16月，中位生存期5月；P-gp(-)24例，生存期1～34月，中位生存期为12.5月，P-gp(-)有明显生存优势(χ2=6.71，P<0.01)。
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表1 P-gp在不同组织学类型肺癌中的表达 组织学类型
n
表达程度
阳性率(%)
-
+
++
+++
NSCLC
腺癌
9
3
2
, 百拇医药
3
1
66.7
鳞癌
28
11
9
6
2
60.7
SCLC
17
13
2
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2
0
23.6
正常组织
10
10
0
0
0
0
表2 P-gp在不同分化程度肺癌中的表达 组织学类型
n
表达程度
, http://www.100md.com
阳性率(%)
-
+
++
+++
腺癌
中高分化
6
1
1
3
1
83.3
低分化
, 百拇医药
3
2
1
33.3
鳞癌
中高分化
21
6
9
5
1
71.9
低分化
7
, http://www.100md.com
5
1
1
28.6
3 讨论
限制肺癌化疗疗效提高的主要因素之一为多药耐药(multidrugresistance，MDR)。其产生的分子生物学基础是，位于人类第7号染色体上的mdr-1基因过度表达，大量转录相应的mRNA，导致其编码的P-gp大量增加，P-gp是位于细胞膜上的药泵，使药物的泵出功能加强，降低了细胞内药物浓度[2]。肺癌组织中P-gp的表达，可间接反应肺癌组织中mdr-1基因的表达。临床上借助免疫组化技术的简便快速、特异性高的特点，直接用于检测肿瘤组织P-gp表达以示耐药性[3]。
本组资料表明，正常肺组织无P-gp(+)表达。化疗前肺癌组织中P-gp(+)表达50%(27/54)，与文献报道相似[4，5]。P-gp在不同组织类型中表达，NSCLC为62.2%(23/37)，其中鳞癌为60.7%，腺癌为66.7%，SCLC为23.6%(4/17)，与临床上腺癌、鳞癌化疗效果差，小细胞肺癌化疗效果好一致。低分化鳞、腺癌P-gp(+)表达率低于中高分化鳞、腺癌，与临床上低分化鳞、腺癌化疗效果较好现象一致。25例接受化疗，P-gp(+)者有效率为11%(1/9)，P-gp(-)者有效率为56.3%(9/16)，说明P-gp(+)化疗效果差。随访36例，P-gp(+)者中位生存期为5月，而P-gp(-)期为12.5月，说明P-gp(+)者生存期短，预后差。
, http://www.100md.com
[参考文献]
1，Ienoardo E,Valente G, Cappia S, et al. Immunohistochemical evalution of P-glycoprotein in human malignancies by monoclonal antibody MC57 [J]. Int J Cancer， 1994,57： 841～ 846.
2，方刚,藏静,刘复坤,等.RT-PCR法检测胃癌组织MDR1基因表达及临床意义[J].中国肿瘤临床，1997，24：169～171.
3，Arceci RJ. Clinical significance of P-glyco-protein in multidrug resistance malignancies [J].Blood,1993， 81( 9) ： 2215～ 2222.
, 百拇医药
4，Kalemkerian GP.Biology of lung Cancer [J].Curr Opin Oncol， 1994， 6： 147～ 155.
5，Volm M， Mattern J， Sansel B.Relationship of inherent resistance to doxorubicin proliferation,activity and expression of p-glycoprotein-170, and glutathione transferase in human lung tumors [J]. Cancer， 1992， 70( 4) ： 764～ 769.
收稿日期：1999-11-11;修回日期：2000-02-02, 百拇医药
单位：崔杰 周俊(甘肃省肿瘤医院内一科 病理科,甘肃兰州730050)；刘慧民(中国民航兰州医院外科,甘肃兰州730020)
关键词：肺癌；P-糖蛋白；免疫组化；预后
癌症000631
中图分类号：R734.2 文献标识码：A
文章编号:1000-467X(2000)06-0608-01
我们用免疫组化法检测经支气管镜活检的肺癌组织中P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)表达特点，分析其与组织类型、分化程度、化疗疗效及预后的关系，以评估其临床应用价值。
1 材料与方法
, http://www.100md.com
1.1材料来源
我院1993年～1995年间经病理确诊的54例肺癌组织，均为化疗前患者的纤维支气管镜活检组织，同时取非肿瘤支气管粘膜及粘膜下组织10例。54例肺癌患者，男40例，女14例，中位年龄56岁(23～73岁)。非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer，NSCLC)37例，其中鳞癌28例，腺癌9例；小细胞肺癌(smallcelllungcancer，SCLC)17例。根据1989年国际抗癌联盟(UICC)的分期进行临床分期：Ⅱ期7例，Ⅲ期28例，Ⅳ期19例。
1.2方法
采用免疫组化S-P法，P-gp单克隆抗体为美国Maxim公司产品，S-P试剂盒为美国Zymed公司产品，先用pH6-0的枸橼酸钠溶液进行微波抗原修复10min，蒸馏水冲洗3次后进行免疫组化染色，用10%的PBS液代替第一抗体阴性对照，以已知阳性的肺癌组织作阳性对照。免疫组化染色方法严格按说明常规操作。P-gp阳性标准：凡胞浆中有棕色颗粒着染者为阳性。程度：片中着染者细胞<20%为(+)，20%～49%(++)，≥50%为(+++)[1]。
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1.3统计方法
χ2检验比较显著性。Kaplan-meier法分析生存率并经Log-rank检验。
2 结果
54例肺癌组织中P-gp(+)检出率50%(27/54)。P-gp(+)在NSCLC和SCLC均有表达，前者表达阳性率高于后者(χ2=5.49，P<0.05)，见表1。中分化及高分化鳞癌、腺癌的P-gp表达阳性率74.1%(20/27)，均高于低分化鳞、腺癌30%(3/10)(χ2=6.03，P<0.05)，见表2。治疗肺鳞癌CAP方案(CTX、ADM、DDP)，肺腺癌MFP方案(MMC、5-Fu、DDP)，小细胞肺癌EP方案(VP-16、DDP)。治疗有效率：25例肺癌接受化疗，P-gp(+)9例中，PR1例，NC4例，PD4例；P-gp(-)16例中，CR2例，PR7例，NC3例，PD4例；P-gp(+)有效率为11%(1/9)，P-gp(-)有效率为56.3%(9/16)。其中P-gp(+)12例，生存期1～16月，中位生存期5月；P-gp(-)24例，生存期1～34月，中位生存期为12.5月，P-gp(-)有明显生存优势(χ2=6.71，P<0.01)。
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表1 P-gp在不同组织学类型肺癌中的表达 组织学类型
n
表达程度
阳性率(%)
-
+
++
+++
NSCLC
腺癌
9
3
2
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3
1
66.7
鳞癌
28
11
9
6
2
60.7
SCLC
17
13
2
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2
0
23.6
正常组织
10
10
0
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表2 P-gp在不同分化程度肺癌中的表达 组织学类型
n
表达程度
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阳性率(%)
-
+
++
+++
腺癌
中高分化
6
1
1
3
1
83.3
低分化
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3
2
1
33.3
鳞癌
中高分化
21
6
9
5
1
71.9
低分化
7
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5
1
1
28.6
3 讨论
限制肺癌化疗疗效提高的主要因素之一为多药耐药(multidrugresistance，MDR)。其产生的分子生物学基础是，位于人类第7号染色体上的mdr-1基因过度表达，大量转录相应的mRNA，导致其编码的P-gp大量增加，P-gp是位于细胞膜上的药泵，使药物的泵出功能加强，降低了细胞内药物浓度[2]。肺癌组织中P-gp的表达，可间接反应肺癌组织中mdr-1基因的表达。临床上借助免疫组化技术的简便快速、特异性高的特点，直接用于检测肿瘤组织P-gp表达以示耐药性[3]。
本组资料表明，正常肺组织无P-gp(+)表达。化疗前肺癌组织中P-gp(+)表达50%(27/54)，与文献报道相似[4，5]。P-gp在不同组织类型中表达，NSCLC为62.2%(23/37)，其中鳞癌为60.7%，腺癌为66.7%，SCLC为23.6%(4/17)，与临床上腺癌、鳞癌化疗效果差，小细胞肺癌化疗效果好一致。低分化鳞、腺癌P-gp(+)表达率低于中高分化鳞、腺癌，与临床上低分化鳞、腺癌化疗效果较好现象一致。25例接受化疗，P-gp(+)者有效率为11%(1/9)，P-gp(-)者有效率为56.3%(9/16)，说明P-gp(+)化疗效果差。随访36例，P-gp(+)者中位生存期为5月，而P-gp(-)期为12.5月，说明P-gp(+)者生存期短，预后差。
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[参考文献]
1，Ienoardo E,Valente G, Cappia S, et al. Immunohistochemical evalution of P-glycoprotein in human malignancies by monoclonal antibody MC57 [J]. Int J Cancer， 1994,57： 841～ 846.
2，方刚,藏静,刘复坤,等.RT-PCR法检测胃癌组织MDR1基因表达及临床意义[J].中国肿瘤临床，1997，24：169～171.
3，Arceci RJ. Clinical significance of P-glyco-protein in multidrug resistance malignancies [J].Blood,1993， 81( 9) ： 2215～ 2222.
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4，Kalemkerian GP.Biology of lung Cancer [J].Curr Opin Oncol， 1994， 6： 147～ 155.
5，Volm M， Mattern J， Sansel B.Relationship of inherent resistance to doxorubicin proliferation,activity and expression of p-glycoprotein-170, and glutathione transferase in human lung tumors [J]. Cancer， 1992， 70( 4) ： 764～ 769.
收稿日期：1999-11-11;修回日期：2000-02-02, 百拇医药