驼峰鼻的分类与整形治疗
作者：李东 秦荣生 谢宏彬 尤维涛 夏有辰 陈育哲 朱力 李建宁
单位：100083 北京医科大学第三临床医学院成形外科
关键词：驼峰鼻；分类
癌症癌症990107
【摘要】目的：为了探讨中华眼镜蛇毒(NNAV)对鼻咽癌(NPC)等抑瘤作用。方法：用MTT法检测NNAV对人高、低分化鼻咽癌细胞株(CNE-1，CNE-2)、慢性红白细胞血病(K562)和鼠肝癌(Hep-2)细胞株的体外细胞毒作用；同时在裸鼠异体移植性人CNE-2肿瘤模型观察NNAV对NPC的抑瘤作用。结果：NNAV对4种体外培养的肿瘤细胞均有明显细胞毒效应，NNAV对上述细胞的作用24hIC50分别为79μg/ml，75μg/ml，5.5μg/ml和65μg/ml，其中以红白血病最敏感；NNAV对肿瘤细胞株CNE-1和CNE-2的细胞毒作用呈明显时效关系。NNAV对荷人NPC裸鼠有明显的抑制作用，抑瘤率28.75%～60.13%，呈明显量效关系。结论：在体内外NNAV对NPC等均有抑瘤作用。
, 百拇医药
中图号：R739.63；R73-36
Experimental study of inhibitory effect of naja naja actra
venom on nasopharyngeal cancer and others
Yang Huiling Yu Qingsheng Jian Zhihan, et al.
Department of Pathophysiogy, Sun Yat-Sen University of Medical sciences, Guangzhou, 510080
【Abstract】 Objective： To research the inhibitory effect of naja naja actra venom (NNAV) on nasopharyngeal carcinoma (NPC) and other tumors in vitro and in vivo. Methods：cytotoxicity effect of NNAV on human cancer cell lines of well and poor differentiated NPC (CNE-1, CNE-2), chronic myelogenous leukemia (K562)and hepatoma (Hep-2) was determined by MTT assay in vitro. Inhibitory effect of NNAV on NPC in BALB/c nude mice (NM) was observed. Results： NNAV has significant cytotoxicity to these four cell lines. The IC50 (24 huour incubation) was 79, 75, 5.5 and 65 μ g/ml respectively. Among them K562 was the most sensitive one. cytotoxity effect of NNAV on human cancer cell limes of CNE-1 and CNE- 2 was in correspondence with time of NNAV. NNAV exhibited significant antitumor activity on nude mice bearing nasopharyngeal cancer. Rates of inhibition were between 28.75 and 60.13 percent. Inhibitory effect of NNAV was in correspondence with dose of NNAV. Conclusions： NNAV exhibited inhibitory effect on NPC and other tumors in vitro and in vivo.
, 百拇医药
Key words: Nasopharyngeal neoplasms; Naja naja actra venom; Antitumor effect; Mice, Nude
近年来，国内外有实验结果显示蛇毒具有抗肿瘤作用〔1～5〕。这些实验结果多来自体外实验，而且体内实验未见系统研究。而中华眼镜蛇毒(naja naja atra venom,NNAV)在体内外对鼻咽癌(naso pharyn-geal carcinoma,NPC)等的抑瘤作用如何?国内外尚未见报道。本研究采用体外MTT法和裸鼠(nudemice,NM)异体移植性人肿瘤模型观察NNAV在体外、体内对人NPC等的抑瘤作用，为NNAV的临床应用提供理论基础和实验依据。
1 材料和方法
1.1动物
BALB/C裸小鼠，雌雄兼用，6～8周龄，无特定病原体(SPF)条件下饲养，由本校动物中心提供。
, 百拇医药
1.2癌细胞株
人高及低分化鼻咽癌细胞株(CNE-1，CNE-2)、人慢性红白细胞血病(K562)和小鼠肝癌(Hep-2)细胞株，用15%小牛血清RPMI1640培养液常规传代，置37℃、5%CO2培养箱培养，取对数生长期的各种细胞进行实验。
1.3药物和主要试剂
中华眼镜蛇毒(NNAV)(1mg/ml)：广州医学院蛇毒研究所提供；噻唑蓝(MTT)：瑞士Fluka公司产品；二甲基亚砜(DMSO)，HEPES和谷氨酸钠均为Sigma公司产品。
1.4体外细胞毒作用试验——MTT法
将对数生长期的细胞种植于96孔培养板中，每孔0.2ml细胞悬液(含5～10×104细胞/孔)，同时加入等量的不同浓度的NNAV液(RPMI-1640培养液释稀)，每浓度设12个平行孔，充分混匀后置培养箱温育24、46或72小时，离心(1500rpm,15分钟)弃上清，每孔加入MTT20μl(5mg/mlPBS)和无血清培养液80μl，混匀后继续培养4小时，再离心弃上清，每孔加入DMSO 200μl，混匀，静置20分钟。细胞对照孔则用RPMI-1640代替NNAV液，空白对照孔用RPMI1640代替细胞悬液和NNAV液，最后用MR5000酶标测试仪以570nm波长测量各孔光密度(OD)，按下列公式计算细胞生长抑制率。每瘤株共重复3次实验。然后以Bliss方法计算半数抑制浓度(IC50)。
, 百拇医药
1.5NNAV对荷人NPC裸鼠的作用
每批取25～30只裸鼠，称重后完全随机分为5组。即正常对照组，接种对照组、3种不同浓度用药组，除正常对照组外，其余各组分别于右腋窝皮下接种CNE-2细胞悬液(1.5×107/ml)，每只0.1ml复制荷人NPC裸鼠模型。3个用药组于接种肿瘤后第2天分别用每毫升含2μg和10μg或1μg，5μg和10μgNNAV溶液(用生理盐水释稀)腹腔注射，每10g体重用0.1ml/次，每天一次，连续20或30天，正常对照组和接种对照组用消毒的生理盐水代替，种瘤后第21天或第31天处死动物，检测各项指标。
1.6瘤体积及抑瘤率计算
根据游标卡尺测出瘤块长和宽计算瘤体积和抑瘤率。
瘤体积=1/2LW2(mm3)
, http://www.100md.com
1.7统计学处理
数据以
±s或%表示，用SAS软件包中的方差分析(ANOVA)和直线回归分析处理数据，均为双侧检验，α取0.05。
2 结果
2.1NNAV对4种体外培养的肿瘤细胞毒作用
采用MTT法测定NNAV对CNE-1、CNE-2、K562和Hep-2细胞毒作用，结果(如表1)表明，NNAV对4种体外培养的肿瘤细胞株均有明显细胞毒效应(与对照组比P<0.05)，NNAV作用24h时IC50依次为79μg/ml、75μg/ml、5.5μg/ml和65μg/ml，随着NNAV作用时间延长，以CNE-1、CNE-2细胞株的细胞毒作用更为明显(P<0.05)，其中以白血病最为敏感，肝癌最不敏感。
, 百拇医药
表1 NNAV对4种体外培养的肿瘤细胞株的细胞毒作用 细胞株
IC50(μg/ml)
24h
48h
72h
CNE-1
79
22
10
CNE-2
75
30
, 百拇医药
10
K562
5.5
5.5
5.2
Hep-2
65
60
50
2.2NNAV对荷人NPC裸鼠的抑瘤作用
结果(如表2)表明腹腔注射1μg/ml～10μg/mlNNAV，0.1ml/10g体重每次，每天1次，连续用药20天或30天，对荷人NPC(CNE-2瘤株)裸鼠均有明显抑瘤作用(P<0.05)，抑瘤率28.75%～60.13%，呈明显量效关系(P<0.05)。同时可见低浓度(1μg/ml)用药组抑瘤作用随用药时间延长，积累总量增大而增强(P<0.05)。另外发现如果用药浓度过低(1μg/ml)和用药时间过短(20天)抑瘤作用不明显(抑瘤率<30%)；而用药浓度过高(20μg/ml)，抑瘤作用虽得到增强(抑瘤率76.25%)，但可出现NNAV的毒性作用。因此，如何提高蛇毒的特异性，值得探讨。
, 百拇医药
表2 NNAV对荷人NPC裸鼠的抑瘤作(±s)动物数(n)体重(g) 细胞株
剂量和用法
(0.1ml·10g-1·d-1)
动物数(n)
体重(g)
瘤体积
(mm3)
抑制率
(%)
开始
, http://www.100md.com
结束
开始
结束
CNE-2
第1批
1.正常对照组
5
5
18.40±1.19
20.30±1.10
2.接种对照组
5
5
, http://www.100md.com
18.30±1.35
19.77±1.33
1031.65±94.87
3.2μg/mlqd×30
5
5
18.30±1.60
19.74±0.79
600.16±60.56a
40.83
4.10μg/ml
, 百拇医药 5
5
18.20±1.60
20.05±0.70
417.68±102.58ab
59.51
CNE-2
第2批
1.正常对照组
6
6
16.67±1.37
, 百拇医药
20.08±1.02
2.接种对照组
6
6
16.83±1.47
17.35±1.01
733.31±84.31
3.1μg/mlqd×20
6
6
16.83±1.47
18.23±1.07
, 百拇医药
522.50±48.04a
28.75
4.5μg/ml
6
6
17.00±1.30
18.49±1.38
396.11±43.63a
45.98
5.10μg/ml
6
6
, 百拇医药
16.92±1.02
18.18±0.79
327.34±41.01ab
55.36
CNE-2
第3批
1.正常对照组
6
6
16.67±1.37
20.08±1.02
2.接种对照组
, http://www.100md.com
6
6
16.83±1.47
18.20±0.84
1146.44±110.96
3.1μg/mlqd×30
6
6
16.83±1.47
19.54±1.30
708.15±94.63a
38.23
, http://www.100md.com
4.5μg/ml
6
6
17.00±1.30
19.52±1.00
651.11±49.69a
43.21
5.10μg/ml
6
6
16.92±1.02
18.96±0.50
, 百拇医药
457.03±84.16ab
60.13
注：a：3.4.5组与2组比较P<0.05b：4、5组与3组比较P<0.05
3 讨论
NNAV是眼镜蛇毒中的一种，国内外已有实验发现蛇毒具有抗肿瘤作用。赵蓉〔3〕等体外实验证实眼镜蛇、金环蛇和银环蛇等蛇毒对多株人肿瘤细胞系有杀伤和抑制作用，其中眼镜蛇毒对肿瘤细胞的杀伤作用最强，胃癌等瘤株对多种蛇毒呈较高敏感性；Borkow〔6〕等发现从眼镜蛇毒中分离出来的细胞毒因子(P4)对体外培养的B16F10黑色素瘤细胞和WEHI-3B白血病细胞系等具有选择性的杀伤作用，并能使细胞发生溶解，主要是这些肿瘤细胞系有细胞毒因子的特异结合位点的存在，P4可与之结合并引起细胞死亡或不可逆破坏。Leung〔7〕等实验表明眼镜蛇细胞毒对艾氏腹水癌细胞有杀伤作用，且呈明显剂量依赖关系。本研究结果表明NNAV对体外培养的CNE-1、CNE-2、K562和Hep-2肿瘤细胞有明显的细胞毒作用，其中对K562作用最强，鼻咽癌次之，肝癌最弱。且随着NNAV作用时间延长，对CNE-1和CNE-2人肿瘤细胞的细胞毒作用更为明显。体内实验结果表明，不同浓度不同疗程的NNAV用药对荷人NPC裸鼠均有明显的抑瘤作用，抑瘤作用呈明显的剂量依赖关系，且在低浓度(1μg/ml)用药组，抑瘤作用随用药时间延长及总量加大而增强。
, 百拇医药
蛇毒的抗肿瘤机理尚未清楚。自从1936年Sarker〔8〕用盐析法从眼镜蛇毒中分离出心脏毒素以来，各种类似的毒素相继被发现。由于其毒性都是通过破坏细胞膜而实现，所以又称之为膜毒素。膜毒素在蛇毒的抗肿瘤作用中发挥重要的作用，目前认为，膜毒素可能通过与细胞膜磷脂成份相互作用，干扰膜转运机制，与膜受体作用和免疫效应等机制而发挥抗癌作用〔9〕。中华眼镜蛇毒抗肿瘤的确切机理仍有待于探讨。
*广东省自然科学基金资助课题(No.920462)
参考文献
[1]Chiou SH, Raunor RL, Zhen B, et al. Cobra venom cardiotoxin (cytotoxin) isoforms and neurotoxin: comparative potency of protein Kinase inhibiton and cancer cell cytotoxity and modes of enzyme inhibiton. Biochemistry, 1993，32：2062.
, http://www.100md.com
[2]苏秀容，潘启超.蛇毒中的直接溶解因子对人肿瘤细胞株的毒性作用.癌症，1994，13(4)：302.
[3]赵蓉，游云，高敏斯，等.蛇毒对人及小鼠传代细胞的杀伤作用.福建医学院学报，1988，22(3)：204.
[4]Chaim MA, Borkow G, Ovadia M. Isolation and characterization of a cytotoxin P4 form the venom of Naja nigricollis nigricallis preferentially active on tumor cells. Biochem Int, 1991，24(3)：415.
[5]Carmichirel J. Evaluation of a tetrazolium based semiautomated colorimentric assay; Asseessment of chemosensi tivity testing. Cancer Res, 1987，47：936.
, 百拇医药
[6]Borkow G, Chaim NA, Ovadia M. Binding of cytotoxin P4 from Naja nigricollis nigricollis to B16 F10 melanoma and WEHI-3B leukemia cells. Fems Microbiol Immunol, 1992，5(1～ 3)：139.
[7]Leung WW, Keung WM, Kong YC. The cytolytic effect of cobra cardiotoxin on Ehrlich ascites tumor cells and its inhibition by Ca2+ . Naunyn-Schmiedebergs Arch Pharmacol, 1976， 292(2)： 197.
[8]Sarker NK. Cardiotoxin from snake venom. Ann Biochem Exp Med, 1947，8：11.
[9]杨惠玲，郭禹标.蛇毒膜毒素抗肿瘤作用的研究进展.癌症，1996，15(1)：72.
(收稿：1997-07-23修回：1997-09-10), http://www.100md.com
单位：100083 北京医科大学第三临床医学院成形外科
关键词：驼峰鼻；分类
癌症癌症990107
【摘要】目的：为了探讨中华眼镜蛇毒(NNAV)对鼻咽癌(NPC)等抑瘤作用。方法：用MTT法检测NNAV对人高、低分化鼻咽癌细胞株(CNE-1，CNE-2)、慢性红白细胞血病(K562)和鼠肝癌(Hep-2)细胞株的体外细胞毒作用；同时在裸鼠异体移植性人CNE-2肿瘤模型观察NNAV对NPC的抑瘤作用。结果：NNAV对4种体外培养的肿瘤细胞均有明显细胞毒效应，NNAV对上述细胞的作用24hIC50分别为79μg/ml，75μg/ml，5.5μg/ml和65μg/ml，其中以红白血病最敏感；NNAV对肿瘤细胞株CNE-1和CNE-2的细胞毒作用呈明显时效关系。NNAV对荷人NPC裸鼠有明显的抑制作用，抑瘤率28.75%～60.13%，呈明显量效关系。结论：在体内外NNAV对NPC等均有抑瘤作用。
, 百拇医药
中图号：R739.63；R73-36
Experimental study of inhibitory effect of naja naja actra
venom on nasopharyngeal cancer and others
Yang Huiling Yu Qingsheng Jian Zhihan, et al.
Department of Pathophysiogy, Sun Yat-Sen University of Medical sciences, Guangzhou, 510080
【Abstract】 Objective： To research the inhibitory effect of naja naja actra venom (NNAV) on nasopharyngeal carcinoma (NPC) and other tumors in vitro and in vivo. Methods：cytotoxicity effect of NNAV on human cancer cell lines of well and poor differentiated NPC (CNE-1, CNE-2), chronic myelogenous leukemia (K562)and hepatoma (Hep-2) was determined by MTT assay in vitro. Inhibitory effect of NNAV on NPC in BALB/c nude mice (NM) was observed. Results： NNAV has significant cytotoxicity to these four cell lines. The IC50 (24 huour incubation) was 79, 75, 5.5 and 65 μ g/ml respectively. Among them K562 was the most sensitive one. cytotoxity effect of NNAV on human cancer cell limes of CNE-1 and CNE- 2 was in correspondence with time of NNAV. NNAV exhibited significant antitumor activity on nude mice bearing nasopharyngeal cancer. Rates of inhibition were between 28.75 and 60.13 percent. Inhibitory effect of NNAV was in correspondence with dose of NNAV. Conclusions： NNAV exhibited inhibitory effect on NPC and other tumors in vitro and in vivo.
, 百拇医药
Key words: Nasopharyngeal neoplasms; Naja naja actra venom; Antitumor effect; Mice, Nude
近年来，国内外有实验结果显示蛇毒具有抗肿瘤作用〔1～5〕。这些实验结果多来自体外实验，而且体内实验未见系统研究。而中华眼镜蛇毒(naja naja atra venom,NNAV)在体内外对鼻咽癌(naso pharyn-geal carcinoma,NPC)等的抑瘤作用如何?国内外尚未见报道。本研究采用体外MTT法和裸鼠(nudemice,NM)异体移植性人肿瘤模型观察NNAV在体外、体内对人NPC等的抑瘤作用，为NNAV的临床应用提供理论基础和实验依据。
1 材料和方法
1.1动物
BALB/C裸小鼠，雌雄兼用，6～8周龄，无特定病原体(SPF)条件下饲养，由本校动物中心提供。
, 百拇医药
1.2癌细胞株
人高及低分化鼻咽癌细胞株(CNE-1，CNE-2)、人慢性红白细胞血病(K562)和小鼠肝癌(Hep-2)细胞株，用15%小牛血清RPMI1640培养液常规传代，置37℃、5%CO2培养箱培养，取对数生长期的各种细胞进行实验。
1.3药物和主要试剂
中华眼镜蛇毒(NNAV)(1mg/ml)：广州医学院蛇毒研究所提供；噻唑蓝(MTT)：瑞士Fluka公司产品；二甲基亚砜(DMSO)，HEPES和谷氨酸钠均为Sigma公司产品。
1.4体外细胞毒作用试验——MTT法
将对数生长期的细胞种植于96孔培养板中，每孔0.2ml细胞悬液(含5～10×104细胞/孔)，同时加入等量的不同浓度的NNAV液(RPMI-1640培养液释稀)，每浓度设12个平行孔，充分混匀后置培养箱温育24、46或72小时，离心(1500rpm,15分钟)弃上清，每孔加入MTT20μl(5mg/mlPBS)和无血清培养液80μl，混匀后继续培养4小时，再离心弃上清，每孔加入DMSO 200μl，混匀，静置20分钟。细胞对照孔则用RPMI-1640代替NNAV液，空白对照孔用RPMI1640代替细胞悬液和NNAV液，最后用MR5000酶标测试仪以570nm波长测量各孔光密度(OD)，按下列公式计算细胞生长抑制率。每瘤株共重复3次实验。然后以Bliss方法计算半数抑制浓度(IC50)。
, 百拇医药
1.5NNAV对荷人NPC裸鼠的作用
每批取25～30只裸鼠，称重后完全随机分为5组。即正常对照组，接种对照组、3种不同浓度用药组，除正常对照组外，其余各组分别于右腋窝皮下接种CNE-2细胞悬液(1.5×107/ml)，每只0.1ml复制荷人NPC裸鼠模型。3个用药组于接种肿瘤后第2天分别用每毫升含2μg和10μg或1μg，5μg和10μgNNAV溶液(用生理盐水释稀)腹腔注射，每10g体重用0.1ml/次，每天一次，连续20或30天，正常对照组和接种对照组用消毒的生理盐水代替，种瘤后第21天或第31天处死动物，检测各项指标。
1.6瘤体积及抑瘤率计算
根据游标卡尺测出瘤块长和宽计算瘤体积和抑瘤率。
瘤体积=1/2LW2(mm3)
, http://www.100md.com
1.7统计学处理
数据以
±s或%表示，用SAS软件包中的方差分析(ANOVA)和直线回归分析处理数据，均为双侧检验，α取0.05。2 结果
2.1NNAV对4种体外培养的肿瘤细胞毒作用
采用MTT法测定NNAV对CNE-1、CNE-2、K562和Hep-2细胞毒作用，结果(如表1)表明，NNAV对4种体外培养的肿瘤细胞株均有明显细胞毒效应(与对照组比P<0.05)，NNAV作用24h时IC50依次为79μg/ml、75μg/ml、5.5μg/ml和65μg/ml，随着NNAV作用时间延长，以CNE-1、CNE-2细胞株的细胞毒作用更为明显(P<0.05)，其中以白血病最为敏感，肝癌最不敏感。
, 百拇医药
表1 NNAV对4种体外培养的肿瘤细胞株的细胞毒作用 细胞株
IC50(μg/ml)
24h
48h
72h
CNE-1
79
22
10
CNE-2
75
30
, 百拇医药
10
K562
5.5
5.5
5.2
Hep-2
65
60
50
2.2NNAV对荷人NPC裸鼠的抑瘤作用
结果(如表2)表明腹腔注射1μg/ml～10μg/mlNNAV，0.1ml/10g体重每次，每天1次，连续用药20天或30天，对荷人NPC(CNE-2瘤株)裸鼠均有明显抑瘤作用(P<0.05)，抑瘤率28.75%～60.13%，呈明显量效关系(P<0.05)。同时可见低浓度(1μg/ml)用药组抑瘤作用随用药时间延长，积累总量增大而增强(P<0.05)。另外发现如果用药浓度过低(1μg/ml)和用药时间过短(20天)抑瘤作用不明显(抑瘤率<30%)；而用药浓度过高(20μg/ml)，抑瘤作用虽得到增强(抑瘤率76.25%)，但可出现NNAV的毒性作用。因此，如何提高蛇毒的特异性，值得探讨。
, 百拇医药
表2 NNAV对荷人NPC裸鼠的抑瘤作(
±s)动物数(n)体重(g) 细胞株剂量和用法
(0.1ml·10g-1·d-1)
动物数(n)
体重(g)
瘤体积
(mm3)
抑制率
(%)
开始
, http://www.100md.com
结束
开始
结束
CNE-2
第1批
1.正常对照组
5
5
18.40±1.19
20.30±1.10
2.接种对照组
5
5
, http://www.100md.com
18.30±1.35
19.77±1.33
1031.65±94.87
3.2μg/mlqd×30
5
5
18.30±1.60
19.74±0.79
600.16±60.56a
40.83
4.10μg/ml
, 百拇医药 5
5
18.20±1.60
20.05±0.70
417.68±102.58ab
59.51
CNE-2
第2批
1.正常对照组
6
6
16.67±1.37
, 百拇医药
20.08±1.02
2.接种对照组
6
6
16.83±1.47
17.35±1.01
733.31±84.31
3.1μg/mlqd×20
6
6
16.83±1.47
18.23±1.07
, 百拇医药
522.50±48.04a
28.75
4.5μg/ml
6
6
17.00±1.30
18.49±1.38
396.11±43.63a
45.98
5.10μg/ml
6
6
, 百拇医药
16.92±1.02
18.18±0.79
327.34±41.01ab
55.36
CNE-2
第3批
1.正常对照组
6
6
16.67±1.37
20.08±1.02
2.接种对照组
, http://www.100md.com
6
6
16.83±1.47
18.20±0.84
1146.44±110.96
3.1μg/mlqd×30
6
6
16.83±1.47
19.54±1.30
708.15±94.63a
38.23
, http://www.100md.com
4.5μg/ml
6
6
17.00±1.30
19.52±1.00
651.11±49.69a
43.21
5.10μg/ml
6
6
16.92±1.02
18.96±0.50
, 百拇医药
457.03±84.16ab
60.13
注：a：3.4.5组与2组比较P<0.05b：4、5组与3组比较P<0.05
3 讨论
NNAV是眼镜蛇毒中的一种，国内外已有实验发现蛇毒具有抗肿瘤作用。赵蓉〔3〕等体外实验证实眼镜蛇、金环蛇和银环蛇等蛇毒对多株人肿瘤细胞系有杀伤和抑制作用，其中眼镜蛇毒对肿瘤细胞的杀伤作用最强，胃癌等瘤株对多种蛇毒呈较高敏感性；Borkow〔6〕等发现从眼镜蛇毒中分离出来的细胞毒因子(P4)对体外培养的B16F10黑色素瘤细胞和WEHI-3B白血病细胞系等具有选择性的杀伤作用，并能使细胞发生溶解，主要是这些肿瘤细胞系有细胞毒因子的特异结合位点的存在，P4可与之结合并引起细胞死亡或不可逆破坏。Leung〔7〕等实验表明眼镜蛇细胞毒对艾氏腹水癌细胞有杀伤作用，且呈明显剂量依赖关系。本研究结果表明NNAV对体外培养的CNE-1、CNE-2、K562和Hep-2肿瘤细胞有明显的细胞毒作用，其中对K562作用最强，鼻咽癌次之，肝癌最弱。且随着NNAV作用时间延长，对CNE-1和CNE-2人肿瘤细胞的细胞毒作用更为明显。体内实验结果表明，不同浓度不同疗程的NNAV用药对荷人NPC裸鼠均有明显的抑瘤作用，抑瘤作用呈明显的剂量依赖关系，且在低浓度(1μg/ml)用药组，抑瘤作用随用药时间延长及总量加大而增强。
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蛇毒的抗肿瘤机理尚未清楚。自从1936年Sarker〔8〕用盐析法从眼镜蛇毒中分离出心脏毒素以来，各种类似的毒素相继被发现。由于其毒性都是通过破坏细胞膜而实现，所以又称之为膜毒素。膜毒素在蛇毒的抗肿瘤作用中发挥重要的作用，目前认为，膜毒素可能通过与细胞膜磷脂成份相互作用，干扰膜转运机制，与膜受体作用和免疫效应等机制而发挥抗癌作用〔9〕。中华眼镜蛇毒抗肿瘤的确切机理仍有待于探讨。
*广东省自然科学基金资助课题(No.920462)
参考文献
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(收稿：1997-07-23修回：1997-09-10), http://www.100md.com